Επισκόπηση Προϊόντος
Το CELLIPOWER06 είναι ένας καλαθοειδής βιοαντιδραστήρας που σχεδιάστηκε ειδικά για την καλλιέργεια προσκολλώμενων κυττάρων με υποστήριξη φύλλων-φορέων (δίσκων από ίνες). Με την αποθήκευση των κυττάρων εντός των ινώδων δίσκων-φορέων, το σύστημα ελαχιστοποιεί στο μέγιστο τη διατμητική τάση και τη ζημιά που προκαλείται από φυσαλίδες. Είναι κατάλληλο για την προσκολλώμενη καλλιέργεια ζωικών και εντομικών κυττάρων, ιδιαίτερα για την παραγωγή μεγάλης κλίμακας εμβολίων ιών, ανασυνδυασμένων πρωτεϊνών και διανυσμάτων ιών. Το σύστημα έχει εφαρμοστεί με επιτυχία σε βιομηχανική κλίμακα 400 L για καλλιέργειες κυττάρων Vero, MDCK και CHO.
Βασικά Τεχνικά Προβάδια
Σχεδιασμός Σταθερής Κλίνης Τύπου Φύλλου
Χρησιμοποιεί μήτρες ανάπτυξης υψηλής πυκνότητας με δομή κυψελών (όπως δίσκοι Fibra-Cel® ή φορείς DISKS), παρέχοντας εξαιρετικά υψηλή ειδική επιφάνεια (περίπου 1200 cm²/g). Αυτό επιτρέπει στα κύτταρα να αναπτύσσονται ως μονοστιβή εντός της δομής του φορέα, βελτιώνοντας σημαντικά την πυκνότητα των κυττάρων και την αποδοτικότητα της καλλιέργειας.
Ελαχιστοποιημένη Διατμητική Τάση
Η σχεδίαση σταθερού κρεβατιού τύπου καλαθιού εξασφαλίζει τους φορείς εντός του βιοαντιδραστήρα, αποτρέποντας πλήρως την επαφή των κυττάρων με τον αναδευτήρα. Η διατμητική τάση μειώνεται στο ελάχιστο, με τη ζωντάνια των κυττάρων να υπερβαίνει το 95%. Είναι ιδιαίτερα κατάλληλη για κύτταρα ευαίσθητα στη διατμητική τάση, όπως τα Vero, MDCK και CHO.
Υψηλή Πυκνότητα Κυττάρων και Σταθερότητα
Τα κύτταρα προσκολλώνται σταθερά εντός της μήτρας του φορέα και είναι λιγότερο πιθανό να αποκολληθούν, επιτρέποντας μακροχρόνια σταθερή καλλιέργεια (>7 ημερών). Αυτό βελτιώνει σημαντικά την απόδοση του προϊόντος, ενώ μειώνει τα επίπεδα DNA των κυττάρων-ξενιστών στο τελικό προϊόν.
Επαλήθευση σε Βιομηχανική Κλίμακα
Εφαρμόστηκε επιτυχώς στην παραγωγή εμβολίων και ανασυνδυασμένων πρωτεϊνών όγκου 400 L, συμπεριλαμβανομένου του εμβολίου λύσσας με κύτταρα Vero, της παραγωγής EPO με κύτταρα CHO και του εμβολίου αβιρίνης γρίπης πτηνών με κύτταρα MDCK.
Μοντουλαρικό Μηχανικό Σχέδιο
Υποστηρίζει εντός γραμμής καθαρισμό (CIP) και αποστείρωση (SIP), προαιρετικά συστήματα αυτόματης φόρτωσης/εκφόρτωσης φορέων και παρακολούθηση του σημείου χαμηλότερης θερμοκρασίας κατά την αποστείρωση, προκειμένου να πληρούνται οι απαιτήσεις GMP.
Δυνατότητα Απομακρυσμένης Παρακολούθησης
Πλήρως ενσωματωμένο με συστήματα SCADA για καταγραφή δεδομένων σε πραγματικό χρόνο και απομακρυσμένο έλεγχο, διασφαλίζοντας τη συνέπεια της διαδικασίας σε πολλαπλές παρτίδες και παραγωγικές εγκαταστάσεις.
Παραγωγή Εμβολίων Ιών
Κύτταρα Vero: Εμβόλιο λύσσας, ανενεργοποιημένο εμβόλιο πολιομυελίτιδας (IPV), εμβόλιο επιδημικής διάρροιας χοίρων, εμβόλιο επιδημικού πυρετού με νεφρικό σύνδρομο, εμβόλιο κλασικής ποντικοπάθειας χοίρων
Κύτταρα MDCK: Εμβόλιο αβιρίνης γρίπης πτηνών
Κύτταρα BSR: Κτηνιατρικό εμβόλιο λύσσας
Δίπλοειδή κύτταρα: Ανθρώπινο εμβόλιο λύσσας (προερχόμενο από δίπλοειδή κύτταρα)
Έκφραση Ανασυνδυασμένων Πρωτεϊνών
Κύτταρα CHO: Ερυθροποιητίνη (EPO)
Κύτταρα Vero: Άλλες ανασυνδυασμένες πρωτεΐνες
Συνεχής καλλιέργεια με διήθηση
Υποστηρίζει συνεχή διήθηση για διάστημα έως 35 ημερών με σταθερή πυκνότητα κυττάρων και χαμηλά επίπεδα υπολειμματικού DNA των κυττάρων-ξενιστών.
Αύξηση κλίμακας και παραγωγή
Κατάλληλο για πλήρη επικύρωση από εργαστηριακή έως βιομηχανική παραγωγή, συμπεριλαμβανομένης της προετοιμασίας δειγμάτων σε πιλοτική κλίμακα και της εμπορικής παραγωγής σε μεγάλη κλίμακα.
Τεχνικές προδιαγραφές
Έργο Επιτρεπόμενου Όγκου
20–400 L
Τύπος φορέα
Φορείς δίσκων από πολυεστέρα (διαθέσιμοι σε διαφορετικά μεγέθη πόρων και πάχους)
Συνιστώμενη φόρτωση φορέα
30 g/L
Έλεγχος Ανάδευσης
50–300 σ.α.λ., με μαγνητική κίνηση
Έλεγχος Διαλυμένου Οξυγόνου (DO)
0–100 %, ±1 % (μέσω μίξης αερίων με ρυθμιστή ροής μάζας)
Έλεγχος Θερμοκρασίας
5–65 °C, ±0,1 °C
Διαλυμένος Οξυγόνος (DO)
40 %, ±2 %, υποστηρίζει μίξη O₂/N₂/αέρα
έλεγχος PH
2–12, ±0,01, εξοπλισμένο με αυτόματο σύστημα τροφοδοσίας αλκαλικού διαλύματος/CO₂
Σύστημα Αερισμού
Βαθύς αερισμός, 0,3–2 vvm
Σύστημα διατροφής
4 ελεγκτές, ο καθένας υποστηρίζει έως 6 περισταλτικές αντλίες υψηλής ακρίβειας
Μέγιστη Πυκνότητα Κυττάρων
Έως 4,5 × 10⁷ κύτταρα/mL
Μέθοδος αποστείρωσης
SIP (Αποστείρωση επί τόπου)
Υλικό
ανοξείδωτο χάλυβα 316L (σύμφωνα με την κατηγορία VI του USP)
Πιστοποιήσεις
FDA 21 CFR Μέρος 11, GMP
Σύστημα Ελέγχου
Κατανεμημένη αρχιτεκτονική με διαχείριση πολυεπίπεδης πρόσβασης χρηστών και λειτουργικότητα καταγραφής ιστορικού ενεργειών
Επιτυχείς Περιπτώσεις Σπουδής
Εμβόλιο Ραβιδοενεφαλίτιδας με κύτταρα Vero
Σε κλίμακα 400 L, επιτεύχθηκε βιωσιμότητα κυττάρων >98 % και τίτλος ιού 1,2 × 10⁶ FFU/mL.
Παραγωγή EPO με κύτταρα CHO
Επιτεύχθηκε σταθερή παραγωγή για 35 ημέρες σε λειτουργία συνεχούς διήθησης, με συνέπεια γλυκοζυλίωσης >90 %.
Εμβόλιο γρίπης πτηνών με κύτταρα MDCK
Σε κλίμακα 400 L, επιτεύχθηκαν αποδόσεις 5 × 10⁸ TCID₅₀/mL με υπολειμματικό DNA οικοδεσπότη κυττάρων <10 pg/mL.
Εμβόλιο λύσσας με διπλοειδή κύτταρα
Επιτεύχθηκε παραγωγή εμβολίου υψηλής καθαρότητας με χαμηλά υπολείμματα DNA οικοδεσπότη κυττάρων, υποστηριζόμενη από φύλλα-τύπου φορείς.
Τεχνικό Συμπλήρωμα
Αρχή λειτουργίας του βιοαντιδραστήρα με φύλλα-τύπου φορείς (δίσκοι ινών)
Ο βιοαντιδραστήρας με φύλλα-τύπου φορείς (γνωστός επίσης ως βιοαντιδραστήρας τύπου καλαθιού) ακινητοποιεί τα κύτταρα εντός υψηλής πυκνότητας μητρών ανάπτυξης με δομή κυψέλης, όπως οι δίσκοι Fibra-Cel® ή οι φορείς DISKS. Αυτό παρέχει ένα στατικό περιβάλλον ανάπτυξης παρόμοιο με τον πολλαπλασιασμό σε κυλινδρικά φιαλίδια, ξεπερνώντας ταυτόχρονα τους περιορισμούς κλιμάκωσης των παραδοσιακών συστημάτων κυλινδρικών φιαλιδίων.
Αυτοί οι φορείς κατασκευάζονται από πολυεστέρα και πολυπροπυλένιο, με πάχος μονού στρώματος περίπου 0,44 mm και μέγεθος πόρων περίπου 15 μm. Με πολύ υψηλή ειδική επιφάνεια (περίπου 1200 cm²/g), υποστηρίζουν την ανάπτυξη μονοστιβάδας κυττάρων εντός του πλέγματος των φορέων. Κατά την καλλιέργεια, οι φορείς στερεώνονται εντός της δομής του καλαθιού μέσα στον αντιδραστήρα, αποτρέποντας την άμεση επαφή των κυττάρων με τον αναδευτήρα, με αποτέλεσμα την ελαχιστοποίηση της διατμητικής τάσης και την επίτευξη ζωντανότητας κυττάρων πάνω από 95%.
Στρατηγική Αύξησης Κλίμακας
Η στρατηγική αύξησης κλίμακας διαφέρει σημαντικά από τους συμβατικούς αναδευόμενους δεξαμενοειδείς αντιδραστήρες:
Σταθερή Δομή Κοίτης
Η φόρτιση των φορέων παραμένει σταθερή για να διασφαλιστεί ομοιόμορφη κατανομή των κυττάρων εντός του πλέγματος.
Βελτιστοποίηση Χαμηλής Διατμητικής Ανάδευσης
Κατά τη βιομηχανική αύξηση κλίμακας, η ταχύτητα ανάδευσης ρυθμίζεται ανάλογα με τον τύπο και την πυκνότητα των φορέων, και συνήθως διατηρείται στο εύρος 50–150 rpm για να αποφευχθεί υπερβολική διατάραξη.
Βελτιστοποίηση Αερισμού
Χρησιμοποιείται βαθιά αεριοποίηση με μικροφυσαλίδες για να αποφευχθεί η άμεση επαφή των φυσαλίδων με τους φορείς και να διασφαλιστεί ομοιόμορφη κατανομή διαλυμένου οξυγόνου.
Συνεχής υποστήριξη διήθησης
Η καλαθοειδής σταθερή κλίνη κρατά τα κύτταρα και τους φορείς, επιτρέποντας σταθερή συνεχή καλλιέργεια για διάστημα έως 35 ημερών και σημαντική βελτίωση της απόδοσης προϊόντος.
Modular Design
Υποστηρίζει γραμμική κλιμάκωση από το εργαστήριο στη βιομηχανική παραγωγή, διατηρώντας παράλληλα σταθερά χαρακτηριστικά υδροδυναμικής και μεταφοράς μάζας.
Πλεονεκτήματα Διεργασίας
Ελαχιστοποιημένη Διατμητική Τάση
Ο σχεδιασμός του φορέα σε μορφή φύλλου με σταθερή κλίνη απομονώνει πλήρως τα κύτταρα από τον αναδευτήρα, καθιστώντας το σύστημα ιδανικό για κύτταρα ευαίσθητα σε διατμητικές δυνάμεις, όπως τα Vero, MDCK και CHO.
Υψηλή Πυκνότητα Κυττάρων και Σταθερότητα
Τα κύτταρα που ενσωματώνονται εντός των φορέων έχουν μικρότερη πιθανότητα αποκόλλησης, επιτρέποντας μακροχρόνια σταθερή καλλιέργεια (>7 ημερών) και σημαντικά υψηλότερες αποδόσεις.
Έλεγχος DNA των κυττάρων-ξενιστών
Ο μηχανισμός ακινητοποίησης κυττάρων με χρήση φορέα μειώνει την απώλεια κυττάρων και μειώνει το υπολειπόμενο DNA των κυττάρων-ξενιστών στο συγκομιδιαίο προϊόν, πληρούμενων έτσι των απαιτήσεων του Παγκόσμιου Οργανισμού Υγείας (WHO) και της Κινεζικής Φαρμακοποιΐας για εμβόλια, οι οποίες ορίζουν όριο ≤100 pg/δόση.
Πλειονεκτήματα Διαδικασίας
Υποστηρίζει λειτουργίες παρτίδας, ενδιάμεσης προσθήκης (fed-batch) και συνεχούς διήθησης (continuous perfusion), ιδιαίτερα κατάλληλες για την παραγωγή ιικών φορέων και εκκρινόμενων πρωτεϊνών.
Βιομηχανική Επικύρωση
Επιτυχώς επικυρώθηκε σε κλίμακα 400 L για πολλαπλά προϊόντα, συμπεριλαμβανομένης της EPO που παράγεται από κύτταρα CHO, του εμβολίου θυλακίου ραβδοειδούς από κύτταρα Vero και του εμβολίου αιωρούς γρίπης από κύτταρα MDCK.
Προεπεξεργασία και Διαδικασία Χρήσης Φορέων
Εμβάπτιση Φορέων
Εμβαπτίστε πλήρως τους δίσκους φορέων από ίνες σε νερό για έγχυση (WFI) ή καθαρό νερό μέχρις ότου εμποτιστούν εντελώς.
ισορρόπηση pH
Ξεπλύνετε με καθαρό νερό μέχρι το pH να προσεγγίσει αυτό του καθαρού νερού.
Αποστείρωση
Τοποθετήστε τους φορείς στο βιοαντιδραστήρα, προσθέστε διάλυμα PBS και αποστειρώστε σε υψηλή θερμοκρασία για 30 λεπτά.
Δοκιμή αποστείρωσης
Μετά την ψύξη, αδειάστε το διάλυμα PBS και γεμίστε με θρεπτικό υλικό για δοκιμή αστειρότητας διάρκειας 48 ωρών.
Εμφύτευση Κυττάρων
Η τυπική πυκνότητα εμφύτευσης είναι 3–5 × 10⁵ κύτταρα/mL. Η διαύγεια του θρεπτικού υλικού μπορεί να παρατηρηθεί περίπου 30 λεπτά μετά την εμφύτευση.
Κανονική Καλλιέργεια
Μετάβαση στις τυπικές συνθήκες καλλιέργειας για την ανάπτυξη των κυττάρων και την παραγωγή του επιθυμητού προϊόντος.
Προοπτικές Βιομηχανικής Εφαρμογής Παραγωγή Εμβολίων
Ικανοποιεί την παγκόσμια ζήτηση υψηλής ποιότητας και οικονομικών εμβολίων, συμπεριλαμβανομένων των εμβολίων κατά της λύσσας, του ανενεργοποιημένου πολιομυελίτιδα (IPV) και των εμβολίων κατά της πτηνινής γρίπης.
Έκφραση Ανασυνδυασμένων Πρωτεϊνών
Ειδικά κατάλληλη για υψηλής αξίας ανασυνδυασμένες πρωτεΐνες που εκφράζονται από κύτταρα CHO, όπως η ερυθροποιητίνη (EPO).
Παραγωγή Ιικών Διανυσμάτων
Υποστηρίζει την παραγωγή μεγάλης κλίμακας AAV, αδενοϊών και άλλων ιικών διανυσμάτων για εφαρμογές γονιδιακής θεραπείας.
Θεραπεία με κύτταρα
Κατάλληλη για την ανάπτυξη θεραπευτικών κυττάρων, όπως τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα (MSCs), υποστηρίζοντας τις προόδους στην αναγεννητική ιατρική.
Συνεχής παραγωγή
Διευκολύνει διαδικασίες συνεχούς διήθησης που βελτιώνουν σημαντικά την παραγωγικότητα και την ποιότητα του προϊόντος, ενώ μειώνουν το κόστος παραγωγής.
